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第一章分子生物学课程概述
分子生物学是21世纪的前沿学科，以重组DNA 技术为基础的基因工程是生命科学发展前沿的一个代表。
分子生物学实验又称基因工程实验是生物学及医学、农林等相关专业本科生的专业核心课程。
通过实验课的学习不仅帮助同学们理解和掌握分子生物学理论知识，也是提高同学们现代生物学实验技能和科学素养、提升综合素质的必要环节。 -
●1.1重组DNA技术的基本原理
基本原理和实验课题内容
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●1.2实验课题内容和流程
实验课题的内容和流程
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●1.3分子生物学实验常规仪器设备配置
了解分子生物学实验室的常规仪器设备配置及其用途
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●1.4分子生物学实验室安全常识
了解在分子生物学实验中常接触的有毒试剂、紫外线、EB废弃物和电、气、水、火的安全使用常识。
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第二章培养基的配制及细菌纯化培养
根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。
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●2.1培养基的配制及菌种的纯化培养
培养基的配制及菌种的纯化培养流程
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●2.2实验室消毒灭菌
实验室消毒灭菌的方法
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●2.3LB培养基的配制和DH5α及含质粒DH5α纯化培养
LB培养基的配制实验步骤
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第三章pBV220质粒的提取
掌握碱裂解法提取质粒的原理和方法
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●3.1质粒提取的原理
碱裂解法提取质粒根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA之间在拓扑学上存在差异而达到使其分离的目的
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●3.2微量移液器的使用
微量移液器的使用方法和注意事项
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●3.3碱法提取质粒
碱法提取质粒的方法
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●3.4试剂盒提取质粒
试剂盒提取质粒的方法步骤
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第四章大肠杆菌基因组DNA的提取及目的基因（dps-6his）的PCR扩增
1. 学习细菌基因组DNA的提取方法
2. 掌握PCR的基本原理与实验技术
3. 了解引物设计的一般要求 -
●4.1目的基因PCR扩增的原理
目的基因PCR扩增及扩增产物回收的原理讲解
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●4.2PCR仪的使用
PCR仪的使用及实验技术
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●4.3目的基因PCR扩增及扩增产物回收
目的基因PCR扩增及扩增产物回收
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第五章质粒及PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测
掌握琼脂糖凝胶电泳检测DNA的原理和方法
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●5.1琼脂糖凝胶电泳检测质粒和目的基因的原理
DNA分子在高于等电点的pH电泳缓冲溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。
分子筛效应，即DNA分子本身的大小和构型。具有不同分子质量的DNA片段在琼脂糖凝胶中迁移速率不一样，就能够对不同长度的DNA进行分离。 -
●5.2琼脂糖凝胶的制备、电泳仪的使用和凝胶成像分析仪的使用
琼脂糖凝胶的制备方法、电泳仪、凝胶成像分析仪的使用方法
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●5.3琼脂糖凝胶电泳检测DNA
琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法介绍
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第六章dps-6his基因与T载体连接后测序鉴定——蓝白斑筛选重组子
掌握dps-6his基因与T载体连接后测序鉴定——蓝白斑筛选重组子的原理和基本操作
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●6.1原理和基本操作
原理和操作的介绍
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第七章大肠杆菌DH5α感受态的制备
大肠杆菌DH5α感受态的制备的原理和操作
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●7.1原理
大肠杆菌DH5α感受态的制备的原理讲解
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●7.2大肠杆菌DH5α感受态的制备和操作
大肠杆菌DH5α感受态的制备和操作
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第八章表达载体pBV-dps-6his的构建和转化
表达载体pBV-dps-6his的构建和转化
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●8.1限制性核酸内切酶
限制性内切酶概念、命名和基本特性
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●8.2DNA连接酶
同限制性内切酶一样，DNA连接酶的发现与应用，对于分子生物学技术的创立与发展也具有重要意义。
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●8.3表达载体pBV-dps-6his的构建-原理（1）
pBV-dps-6his表达载体的构建
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●8.4表达载体pBV-dps-6his的构建-原理（2）
表达载体pBV-dps-6his的构建原理讲解
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●8.5表达载体pBV-dps-6his的构建和操作
表达载体的构建原理和结果
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●8.6表达载体pBV-dps-6his的构建原理和结果
表达载体构建的步骤与结果
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第九章 重组DNA的转化与阳性克隆鉴定
阳性克隆重组质粒pBV-dps-6his的鉴定
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●9.1外源DNA的转化方法介绍
外源DNA的转化方法的原理和步骤讲解
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●9.2表达载体pBV-dps-6his的转化和操作
表达载体pBV-dps-6his的转化和操作的实验步骤
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●9.3阳性克隆（含重组质粒pBV-dps-6his）的筛选鉴定
阳性克隆的筛选鉴定方法
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●9.4阳性克隆（含重组质粒pBV-dps-6his）的筛选鉴定和操作
阳性克隆（含重组质粒pBV-dps-6his）的筛选鉴定的实验操作
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第十章Dps-6His蛋白的诱导表达及SDS-PAGE电泳检测
Dps-6His蛋白的诱导表达及SDS-PAGE电泳检测的原理讲解及实验操作
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●10.1目的基因的诱导表达原理
1.了解蛋白表达系统的特点
2.掌握大肠杆菌DH5α菌株和pBV220表达载体的特点
3.了解目的基因诱导表达的常用方法 -
●10.2聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表达产物原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和类型
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●10.3电泳中常出现的问题
表达检测的原理
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●10.4实验步骤
Dps-6His蛋白的诱导表达及SDS-PAGE电泳检测实验操作
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第十一章蛋白质印迹(Western-blot)法鉴定Dps-6His蛋白
蛋白质印迹(Western-blot)法鉴定Dps-6His蛋白的原理、注意事项、应用和实验操作
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●11.1Western blot原理、注意事项及应用
Western blot原理、注意事项及应用
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●11.2蛋白质印迹所需试剂及材料
蛋白质印迹步骤及材料
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●11.3Western-blot所需要的主要的仪器和试剂
Western-blot所需要的主要的仪器和试剂
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●11.4湿转膜法Western blot检测目的蛋白
半干转膜法Western blot检测目的蛋白的实验操作
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●11.5半干转膜法Western blot检测目的蛋白
湿转膜法Western blot检测目的蛋白的实验操作
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●11.6Western blot-免疫检测目的蛋白
Western blot-免疫检测目的蛋白的实验操作步骤
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第十二章Ni柱亲和层析法分离纯化Dps-6His蛋白
Ni柱亲和层析法分离纯化Dps-6His蛋白的纯化原理讲解
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●12.1基因工程表达蛋白的纯化——原理
基因工程表达蛋白的纯化原理讲解
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●12.2Dps蛋白的纯化原理
Dps蛋白的纯化原理讲解
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●12.3Dps-6His蛋白的功能鉴定原理
Dps-6His蛋白纯化操作步骤
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●12.4Dps-6His蛋白诱导表达和纯化
Dps-6His蛋白诱导表达和纯化实验操作
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第十三章Dps-6His蛋白的功能鉴定
Dps-6His蛋白的功能鉴定——抗羟基自由基保护DNA的功能原理讲解和实验操作
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●13.1Dps-6His蛋白的功能鉴定原理
Dps-6His蛋白的功能鉴定实验原理
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●13.2Dps-6His蛋白的功能鉴定-操作
Dps-6His蛋白的功能鉴定的操作步骤
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●13.3Dps十二聚体结构PAGE电泳鉴定
Dps十二聚体结构PAGE电泳鉴定的实验操作
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●13.4 Dps-6His蛋白抗氧化保护的功能鉴定
Dps-6His蛋白抗氧化保护的功能鉴定的实验操作
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第十四章TRIzol法提取RNA
真核细胞总RNA的提取及检测原理和实验操作
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●14.1RNA提取原理
RNA提取的基本原理讲解
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●14.2细胞中总RNA的提取
细胞中总RNA的提取的实验操作
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●14.3NanoDrop法测定RNA
NanoDrop法测定RNA实验操作
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第十五章反转录PCR扩增真核生物目的基因及扩增产物电泳检测
反转录PCR扩增真核生物目的基因及扩增产物电泳检测
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●15.1RT-PCR的基本原理
RT-PCR的基本原理讲解
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●15.2RT-PCR扩增目的基因及检测
RT-PCR扩增目的基因及检测的实验操作
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第十六章Dps融合蛋白表达载体的构建（ pBV-dps-2x-6his及pBV-dps-目的基因-6his）及诱导表达
Dps融合蛋白表达载体的构建（ pBV-dps-2x-6his及pBV-dps-目的基因-6his）及诱导表达的原因、构建原理
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●16.1融合蛋白表达载体的构建原理
融合蛋白表达载体构建的原理讲解
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●16.2pBVdps2x6His融合表达载体构建-原理
pBVdps2x6His融合表达载体构建-原理的讲解
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●16.3Dps融合蛋白表达载体的构建原理
Dps融合蛋白表达载体的构建原理的讲解
