生物化学实验
生物化学实验
3万+ 人选课
更新日期:2026/06/11
开课时间2020/03/27 - 2020/12/28
课程周期40 周
开课状态已结课
每周学时-
课程简介

《生物化学实验》是北京大学生命科学学院开设的一门本科生主干基础课,课程实验内容涵盖了定量分析技术、层析技术、电泳技术、生物大分子制备技术、酶学技术及免疫学技术。本课程的目标在于让学生熟练掌握常用生物化学实验方法的原理和技术,熟悉生物化学的常用仪器,训练学生的实验动手能力,加深学生对生物化学理论知识的理解,最终以培养学生严谨求实的科学态度、提高学生分析解决问题的能力为培养目标。

课程大纲
生物化学实验绪论
1.1生物化学实验简介
1.2生物化学实验必读
1.3生物化学实验常用仪器
1.4基本实验操作:离心技术
1.5基本实验操作:移液技术
生物大分子制备技术
2.1概述
2.2生物大分子制备的前期处理
2.3生物大分子的提取
2.4生物大分子的分离纯化
2.5生物大分子的沉淀分离
2.6生物大分子样品的浓缩
2.7生物大分子样品的保存
2.8生物大分子的含量测定与纯度鉴定
生物大分子定量测定技术
3.1概述
3.2紫外-可见吸收光谱分析
3.3单糖定量测定:3,5-二硝基水杨酸法
3.4核酸定量测定:紫外吸收法
3.5蛋白质定量测定:Folin-酚法
3.6蛋白质定量测定:Bradford法
3.7标准曲线制作与蛋白质浓度计算
3.8双光束紫外-可见分光光度计的使用
3.9酶标仪的使用
3.10考马斯亮蓝G-250溶液配制
层析技术
4.1概述
4.2凝胶过滤层析
4.3离子交换层析
4.4亲和层析
4.5柱层析系统基本操作
4.6层析图谱
4.7核酸-蛋白检测仪和记录仪的使用
电泳技术
5.1电泳原理与分类
5.2影响电泳的因素
5.3琼脂糖凝胶电泳
5.4聚丙烯酰胺凝胶电泳
5.5SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
5.6等电聚焦电泳
5.7双向凝胶电泳
5.8凝胶染色方法
5.9分离胶缓冲液的配制
5.10凝胶模具组装
免疫学实验技术
6.1抗原与抗体
6.2抗原抗体反应与免疫学检测技术
6.3免疫血清的制备
6.4抗体的纯化
6.5酶联免疫吸附测定-间接法测定抗血清效价
6.6蛋白质免疫印迹实验
6.7蛋白质免疫印迹的检测方法
6.8PBST及抗体稀释液的配制
谷胱甘肽转硫酶GST的分离纯化及酶动力学综合实验
7.1实验概述
7.2兔肝GST酶的提取制备
7.3亲和层析法纯化兔肝GST酶
7.4GST的酶活力测定
7.5GST酶的蛋白质浓度测定和酶比活力计算
7.6GST酶的Km和Vmax值测定2
7.7GST酶亲和层析缓冲液A配制
绿色荧光蛋白GFP的表达、纯化及鉴定综合实验
8.1实验概述
8.2绿色荧光蛋白GFP的原核表达
8.3大肠杆菌裂解与可溶性蛋白提取
8.4His-GFP蛋白的镍柱纯化
8.5SDS-PAGE电泳1:电泳样品制备
8.6SDS-PAGE电泳2:配制凝胶
8.7SDS-PAGE电泳3:上样及电泳
8.8SDS-PAGE电泳4:卸胶及凝胶染色
8.9蛋白质免疫印迹1:WB的实验准备
8.10蛋白质免疫印迹2:蛋白质转印与封闭
8.11蛋白质免疫印迹3:WB的一抗和二抗孵育
8.12蛋白质免疫印迹4:WB的DAB显色
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