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绪章课程整体介绍
细胞工程制药技术概述,主要包括细胞工程制药定义、细胞工程制药技术种类、动物细胞培养的基本概念及发展史和植物细胞培养的基本概念及发展史几个方面。
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●0.1细胞制药技术概述
本节主要讲解了细胞工程制药定义、细胞工程制药技术种类、动物和植物细胞培养的基本概念及发展史。
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第一章贴壁培养法生产促红细胞生成素
促红细胞生成素(EPO)又称红细胞刺激因子、促红素,是一种人体内源性糖蛋白激素,可刺激红细胞生成。缺氧可刺激促红细胞生成素产生,早已有重组人促红细胞生成素用于临床,用于治疗肾功能不全合并的贫血、获得性免疫缺陷综合征/艾滋病本身或治疗引起的贫血、恶性肿瘤伴发的贫血及风湿病贫血等多种贫血。
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●1.1工程细胞获得
动物细胞培养技术技术几乎已应用到生物、医学研究的各个领域。这门技术自创立至今,已在多个学科领域甚至生产实践中发挥了巨大的作用。
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●1.2细胞培养用液的配制
培养液是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。
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●1.3种子链扩增
本节主要讲解了动物细胞培养的常用设备和特殊设备;动物细胞培养常用用品;培养用品的清洗与包装方法;无菌操作要点;动物细胞的冻存原理与操作和动物细胞的复苏原理与操作;原代培养的首次传代要点、动物细胞传代方法和细胞系的维持工作要点等。
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●1.4反应器生产
本节主要讲解了各种动物细胞培养反应器的结构及原理;大规模动物细胞培养的培养法以及其他相关内容。
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第二章CHO 细胞生产抗 HER2单克隆抗体
CHO 细胞生产抗 HER2单克隆抗体
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●2.1细胞传代与扩增(悬浮细胞)
种子链扩增 悬浮细胞传代的方法一般有直接传代和离心传代两种。
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●2.2反应器生产工艺
抗HER2单克隆抗体生产 反应器生产主要在于过程控制,包括生长期连续流加控制、生产期流加控制、不同糖浓度对细胞代谢的影响、生产期温度控制、生产期pH值控制、生产期溶解氧控制。收获与废弃都需要建立相应的指标。
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第三章 悬浮培养法生产胡萝卜素
浮培养指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里,培养单细胞及小细胞团的组织培养系统,是非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。
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●3.1MS培养基的配制
MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。
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●3.2胡萝卜伤愈组织的诱导
愈伤组织(callus)是指原植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。
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●3.3胡萝卜细胞的悬浮培养
植物细胞悬浮培养的操作步骤,包括愈伤组织的诱导、建立悬浮体系并进行继代培养、监控悬浮细胞的生长动态、实现悬浮细胞的同步化培养。使植物细胞同步化的方法有饥饿法法、抑制法、分选法和低温处理。
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第四章实验操作
实验操作
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●4.1倒置显微镜1
倒置显微镜1
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●4.2倒置显微镜2
倒置显微镜2
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●4.3二氧化碳培养箱
二氧化碳培养箱
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●4.4液氮罐
液氮罐
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●4.5超净台
超净台
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●4.6动物细胞无菌操作
动物细胞无菌操作
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●4.7动物细胞冻存
动物细胞冻存
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●4.8动物细胞复苏
动物细胞复苏
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●4.9动物细胞的传代
动物细胞的传代
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●4.10细胞计数
细胞计数
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●4.11动物细胞活力检查
动物细胞活力检查
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●4.12细胞工厂使用
细胞工厂使用