生命科学综合实验
生命科学综合实验
1000+ 人选课
更新日期:2025/05/20
开课平台学银在线
开课高校同济大学
开课教师邵志华吕立夏
学科专业医学基础医学类
开课时间2025/02/12 - 2025/07/31
课程周期25 周
开课状态开课中
每周学时-
课程简介

课程围绕研究项目“miRNA-X的功能研究”展开,由系列综合性、设计性实验组成,包括miRNA-X的生物信息分析、miRNA-X表达载体的构建、核型分析和荧光原位杂交技术、细胞培养和转染、质粒提取、RNA提取、荧光定量PCR、Western Blot等细胞、遗传和分子生物学实验技术;低温高速离心机、Nanodrop核酸定量仪、qPCR仪、荧光显微镜和电转仪等常规的仪器设备的使用;引物设计、对照设计和论文撰写方法和原则。


课程大纲

总论

  • 1.1 实验简介
  • 1.2 生物安全
  • 1.3 常用仪器的使用
  • 1.4 软件使用
  • 1.5 拓展1.科学家怎样做科研

人染色体核型分析实验

  • 2.1 前置思考题
  • 2.2 PPT课件
  • 2.3 实验讲解视频
  • 2.4 实验操作视频1-血细胞体外培养和染色体标本制备
  • 2.5 实验操作视频2-正常核型分析
  • 2.6 结果分析视频1-正常核型
  • 2.7 结果分析视频2-异常核型
  • 2.8 虚拟实验
  • 2.9 课后作业

生物信息

  • 3.1 概述
  • 3.2 miRBase数据库的使用
  • 3.3 TargetScan数据库的使用
  • 3.4 UCSC数据库的使用
  • 3.5 引物设计

miRNA表达载体构建

  • 4.1 概述
  • 4.2 实验原理
  • 4.3 实验操作
  • 4.4 重组质粒鉴定
  • 4.5 拓展1.miRNA命名原则
  • 4.6 拓展2. 实验设计原则

重组质粒提取与鉴定

  • 5.1 概述
  • 5.2 实验原理
  • 5.3 实验操作
  • 5.4 质粒评估

细胞转染

  • 6.1 概述
  • 6.2 实验原理
  • 6.3 实验操作
  • 6.4 结果分析
  • 6.5 拓展:磷酸钙转染法

CCK-8法检测细胞活力

  • 7.1 概述
  • 7.2 实验原理
  • 7.3 实验操作
  • 7.4 结果分析

实时定量PCR检测基因表达

  • 8.1 概述
  • 8.2 RNA提取
  • 8.3 mRNA逆转录
  • 8.4 实时定量PCR

Western blot 检测蛋白质表达

  • 9.1 概述
  • 9.2 样品制备
  • 9.3 SDS-PAGE
  • 9.4 蛋白免疫印迹杂交
  • 9.5 底物显色
  • 9.6 拓展1.抗体的选择
  • 9.7 拓展2. 蛋白质印迹膜

总结与测试

  • 10.1 论文撰写
  • 10.2 模拟测试