第一章绪论

实验血液学是以血液和造血组织为研究对象，利用动物实验或体外实验来研究血液系统发生发展的机制、结构、功能、病理意义和临床应用价值。本章主要介绍实验血液学的概念、发展史、课程内容及学习方法。

●1.1实验血液学概述

实验血液学是以血液和造血组织为研究对象，利用动物实验或体外实验来研究血液系统发生发展的机制、结构、功能、病理意义和临床应用价值。本章主要介绍实验血液学的概念、发展史、课程内容及学习方法。

第二章基础血液学实验原理与方法

基础血液学检查是反映机体疾病最基础、最有效、最广泛地检验手段，对许多疾病的诊断甚至早期诊断具有重要的指向作用。虽然高科技的血液分析仪普遍应用，显微镜目测检查仍不失为最常用、最基本、能早期并简便地发现某些病因的常规血液检查的实验手段。本章主要针对血液中的三种主要有形成分，即红细胞、白细胞、血小板的量与质而言，介绍血液一般检查的原理、操作方法和临床应用，包括血涂片细胞形态学检查和血细胞计数技术。

●2.1血涂片细胞形态学检查

外周血涂片检查是最常用的血液系统疾病检查手段，能为临床提供大量的信息。本节内容突出血涂片的形态学检查在临床中的重要性。内容包括血涂片制备、血涂片染色、红细胞形态学检查和白细胞形态学检查。

●2.2血细胞计数技术

血细胞数量变化是发现某些疾病的指标之一，显微镜目测计数法是最基本、最常用的检验技术。本节突出手工法血细胞计数的重要性，内容包括计数板的结构和使用、红细胞计数、网织红细胞计数、白细胞计数、白细胞分类计数、嗜酸性粒细胞计数和血小板计数。

第三章造血细胞检验

造血检验在多种血液病的诊断、鉴别诊断、治疗方案的制定、疗效评估、预后判断以及疾病的病因和发病机制的研究中有广泛应用。造血检验的技术方法有很多种如骨髓细胞形态学检验技术、免疫学技术、细胞遗传学技术和分子生物学技术等。其中细胞形态学检查是造血检验最常规和最基本的方法。正确识别各类各阶段正常及异常形态血细胞是血液学检验的基础和疾病诊断的重要依据。以化学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学等技术为基础发展起来的现代血液学技术进一步拓宽了血液检验的研究范围，为从分子水平研究血细胞的生物学等特征，阐明造血、造血调控和造血系统疾病的发病机制，为造血系统疾病的诊断、治疗等提供了可靠的技术和手段。

●3.1正常骨髓细胞形态

正确识别各类各阶段正常及异常形态血细胞是血液学检验的基础和疾病诊断的重要依据。
正常血细胞包括粒细胞、红细胞、巨核细胞、淋巴细胞、单核细胞及浆细胞系统，各系细胞具有各自的形态特点，各系形态特征在成熟阶段表现最为明显。

●3.2骨髓形态学检查

骨髓细胞形态学检查是造血检验的最基础、最经典的方法之一，也是诊断血液系统疾病、观察疗效及病情变化的重要手段之一。骨髓细胞形态学检查的基础是正确识别各类骨髓细胞形态特点。骨髓检查的常规步骤为：骨髓取材→常规染色→低倍镜观察→油镜观察→计算结果→填写报告单→标本登记及保存。

●3.3血细胞染色体检验

血细胞染色体检验技术主要包括：染色体非显带技术、染色体显带技术、染色体高分辨技术、姐妹染色单体互换技术、染色体脆性部位显示技术和早熟凝集染色体技术等。血细胞染色体检验成为血液病研究不可缺少的方法，临床上已广泛用于血液系统疾病的诊断、分型、治疗方案的制定、预后判断和微小残留病灶的检测等。

第四章细胞化学染色检验

血细胞化学是近代组织化学的分支。最早应用于组织学的化学检查，故称为组织化学染色。后来又广泛用于细胞学方面的研究，所以多数又称为细胞化学染色。它是细胞学和化学相结合而形成的一门科学，是以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理对血细胞内的何种化学成分（如酶类、酯类、蛋白质、核酸、铁等）作定性、定位、半定量分析的方法。

●4.1细胞化学染色

过氧化物酶是广泛存在于生物体中的一类酶，大部分含有血红素，是一种结合蛋白。血细胞所含的过氧化物酶主要为髓过氧化物酶，髓过氧化物酶是人类中性粒细胞含量最多的一种蛋白质。过氧化物酶染色时，血细胞内的POX能分解双氧水而释放出新生态氧，后者氧化二氨基联苯胺，形成金黄色不溶性沉淀，定位于POX酶所在的活动部位。

第五章血液生物化学检验

本章主要介绍有助于明确贫血病因的红细胞疾病特殊检验项目和技术。包括溶血的一般检验、铁代谢检验、叶酸及维生素B12测定、红细胞膜缺陷检验、红细胞酶缺陷检验、血红蛋白异常检验等。

●5.1溶血的一般检验

溶血性贫血的检查除红细胞计数及其相关参数测定、网织红细胞计数、胆红素测定等一般检查外还常包括血浆游离血红蛋白测定、血清结合珠蛋白测定、血浆高铁血红素白蛋白测定和尿含铁血黄素试验。

●5.2铁代谢检验

铁代谢的检测项目有：血清铁、血清铁蛋白、血清总铁结合力和转铁蛋白饱和度、血清转铁蛋白和血清转铁蛋白受体测定，主要用于缺铁性贫血的诊断及其与小细胞低色素性贫血的鉴别诊断。

第六章血液免疫学检查

本章主要介绍免疫因素所致溶血性贫血的检测、粒细胞抗体检测、血小板表面相关抗体和补体测定、血细胞免疫表型检测、流式细胞仪在血液学中的应用。

●6.1血细胞免疫表型分析技术

常用血细胞免疫表型分析方法包括荧光显微镜计数、碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶标法、流式细胞技术三种。其中流式细胞技术已成为检测细胞膜、细胞质及细胞核中多种物质常用而准确的方法，在白血病免疫分型、微量残留病变、红细胞 CD55、CD59及表面相关免疫球蛋白测定、造血干细胞计数等方面应用广泛。

●6.2流式白血病免疫表型分析

流式白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体作分子探针，多参数分析白血病细胞的细胞膜、细胞质或细胞核的抗原表达，由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。对白血病的诊断与分型、治疗方案选择与预后判断、发病机制研究等有重要价值。

第七章血栓与止血检验

血栓与止血包括止血、凝血、抗凝血及纤溶系统，本章主要讲述了血栓与止血的基础理论、包括血管内皮的功能、血小板的功能、凝血因子、凝血机制、抗凝系统、纤溶系统及它们之间的调控网络。在此基础上，介绍临床常用的出、凝血检验项目、原理及操作，包括血小板功能检查、凝血四项的检查及血栓弹力图仪的操作。在本章的学习过程中，要注意基础理论与检验技术相结合、检验项目与临床应用相结合、基本理论与科研进展相结合。

●7.1血管壁和血管内皮的止血作用

血管壁的止血主要表现在血管内皮细胞的止血作用，血管内皮细胞直接与血液接触，不但参与一期止血，还参与及调控血液凝固、抗凝血、纤溶和抗纤溶过程，其中血栓调节蛋白（TM）在凝血系统平衡中起到关键性的调控作用。目前主要通过检测出血时间、血管性血友病因子及血管内皮细胞损伤的标志物来分析血管壁和血管内皮细胞的功能。

●7.2血小板的止血作用

血小板的结构主要包括表面结构、骨架系统和收缩蛋白、细胞器和内容物及特殊膜系统，血小板的结构与其功能高度相关。生理条件下，血小板处于静息状态，当血小板活化时，形态变化、膜表面糖蛋白的构像发生改变，同时释放其颗粒内容物，通过粘附、聚集和释放反应发挥促凝及血块收缩等功能，参与一期和二期止血。通过体外实验检测血小板的功能（如血小板粘附实验、聚集实验、血小板活化分析等），可以部分反映血小板的生理、病理变化，有助于血小板相关疾病的诊断与治疗。

●7.3血液凝固

人体经典途径的凝血因子包括I~XIII（除外VI）,共12个凝血因子，除Ca2+外都是蛋白质，除组织因子外都存在于血浆中。凝血系统的激活一般分为凝血启动和凝血放大两个阶段，是一系列的酶促反应过程，FXa生成、凝血酶生成和纤维蛋白生成是血液凝固的三个重要阶段。通过自动凝血分析仪可以检测凝血因子水平或功能的变化，为临床提供重要的实验室数据，常用的检测方法有血浆凝固法、发色底物法及免疫浊度分析法等。

●7.4抗凝血系统

生理情况下，凝血系统是有低水平活性的，因有生理水平的细胞抗凝和体液抗凝存在，使二者处于低水平的动态平衡。细胞抗凝主要包括血管内皮细胞合成分泌抗凝血蛋白、光滑的内皮阻止血小板的粘附及单核-巨噬细胞对活化凝血因子的清除作用；体液抗凝主要通过抗凝血蛋白（包括抗凝血酶、蛋白C系统、组织因子途径抑制物等）抑制凝血反应。实验室通过检测生理性抗凝蛋白及病理性抗凝物质为临床诊断提供依据。

●7.5纤维蛋白溶解系统

纤溶系统的主要功能是使体内产生的纤维蛋白凝块随时得到清除，与凝血过程相互制约，纤维蛋白溶解过程一般分为两个阶段，即纤溶酶原激活阶段和纤溶酶水解纤维蛋白（原）阶段。实验室通过检测纤溶有关组分或纤维蛋白（原）降解产物，可以反应体内纤溶活性、提示血栓前状态和血栓性疾病及对溶栓药物治疗进行监测。

●7.6血栓形成

血栓形成是止血过度激活的一种病理性状态，根据发生部位和组成成分不同分为白色血栓、红色血栓、血小板血栓、微血管血栓及混合血栓。血管壁损伤、血液成分的改变和血流淤滞是血栓形成的三要素。血栓弹力图仪是一种能够动态监测整个凝血过程的分析仪，能够对凝血、纤溶全过程及血小板进行全面检测，用于凝血功能障碍的诊断、指导成分输血，并且是肝移植手术的国际通用设备。

第八章血液学检验常用仪器

科学技术的发展，使实验室设备和检测手段不断更新，推动了医学新技术及新项目的临床应用，随着临床实验室各种现代化检测仪器的不断涌现和广泛应用，临床医学对仪器的依赖性也在不断增强。本章所讲仪器，均为适用于疾病预防诊断和研究以及治疗监测、药物分析的精密设备，学习本章的目的是使操作者掌握各种常用的实验仪器的工作原理、基本结构、使用方法，熟悉其性能、了解其分类，使仪器在临床疾病的诊断和治疗中发挥出最佳效能。

●8.1显微镜

光学显微镜是实验室的基础设备，常用于各种细胞、微生物、有形成分的观察鉴别，本节主要介绍显微镜的工作原理、结构和使用，使学生能够掌握显微镜的基本操作和原理。

●8.2离心机

离心机是生命科学研究的基本设备，特别在生物化学和分子生物学研究领域广泛运用，随着生物学研究对分离设备日益增多的需求而有了很大的发展。本节主要介绍离心机的工作原理、分类、结构和使用，使学生能够掌握离心机的基本操作和原理。

●8.3血细胞分析仪

血细胞分析仪是血液学研究的主要仪器之一，也是临床血液检验的重要仪器，本节主要学习血细胞分析仪的分类、原理、结构和使用，使学生能够充分的了解血细胞分析仪，进而能够熟练使用。

●8.4血凝仪

血液凝固分析仪是血液流变分析仪器之一，也是血栓与止血分析的专用仪器，可检测多种血栓与止血指标，是目前血栓与止血实验室分析中广泛使用的设备。本节主要学习血液凝固分析仪的分类、原理、结构和使用，帮助学生充分了解血液凝固分析仪，从而熟练使用。

●8.5流式细胞仪

流式细胞仪是对单个细胞或其他生物微粒进行快速定量分析和分选的仪器，是现代医学研究最先进的分析仪器之一，具有检测速度快、精度高、测量指标多、采集数据量大、分析全面、方法灵活等特点。本节主要学习流式细胞仪分类、原理、结构和使用，使学生能够充分的了解流式细胞仪，进而为以后能够熟练使用该仪器打下坚实基础。